L-iskoperta tan-newropeptide Y (NPY) tiddependi primarjament fuq metodi immunoloġiċi, inkluż l-enzyme{0}}assay immunosorbent linked (ELISA) għal analiżi kwantitattiva u immunoistokimika (IHC) għall-lokalizzazzjoni tat-tessuti.
ELISA huwa metodu użat komunement għad-determinazzjoni kwantitattiva tal-livelli NPY f'kampjuni bijoloġiċi bħal serum uman, plażma, omoġenati tat-tessuti, lisati taċ-ċelluli, u supernatanti tal-kultura taċ-ċelluli. Tipikament timpjega prinċipju ta' inibizzjoni kompetittiva: l-antikorpi monoklonali NPY huma miksija fuq mikropjanċa, u kemm l-antiġen ittikkettat bil-bijotina- kif ukoll il-kampjun li fih l-antiġen fil-mira huma miżjuda. L-antiġen fil-mira jikkompeti mal-antiġen ittikkettat biex jeħel mal-antikorpi. Wara pass tal-ħasil, HRP-avidin ittikkettat u s-substrat TMB huma miżjuda għall-iżvilupp tal-kulur; l-intensità tal-kulur hija inversament proporzjonali għall-konċentrazzjoni NPY fil-kampjun. Dan il-metodu joffri sensittività u speċifiċità għolja, b'firxa ta 'skoperta tipika ta' 24.69 pg/mL sa 2000 pg/mL u limitu aktar baxx ta 'skoperta taħt 9.59 pg/mL.
IHC jintuża biex tiġi lokalizzata l-espressjoni u d-distribuzzjoni ta 'NPY fi ħdan sezzjonijiet tat-tessuti. Billi juża antikorpi speċifiċi biex jorbtu ma' NPY fit-tessut u juża reazzjoni kromoġenika għall-viżwalizzazzjoni, dan il-metodu jippermetti l-analiżi kwalitattiva jew semi-kwantitattiva tal-espressjoni ta' NPY f'tessuti differenti.
